拓扑异构酶I

英文名称：Topoisomerase I

其他名称：牛痘DNA拓扑异构酶I

CAS号：80449-01-0

级别：BR

Vaccinia DNA Topoisomerase I具有解超螺旋的酶(DNA Relaxing Enzyme)活性，可以通过快速的酶切和连接从而使双链共价闭合环状的正或负超螺旋DNA发生解超螺旋，从而可以形成含有较少的正或负超螺旋的双链环状的DNA分子。Vaccinia DNA Topoisomerase I也能使双链DNA形成绳结(knotting)或解开绳结(unknotting)，联结互补的单链环状DNA成为双链环状DNA。Vaccinia DNA Topoisomerase I目前常被作为一种DNA重组连接的新型工具酶，用于DNA载体和重组片段的连接、缺刻修复、接头连接等。
Vaccinia DNA Topoisomerase I能够特异性识别双链DNA中5'-… (C/T)CCTT…-3'序列，并酶切该序列中最后一个T和其之后的核酸序列之间的磷酸二酯键(5'-…(C/T)CCTT…-3')。在此过程中，断裂的磷酸二酯键的能量可以通过Vaccinia DNA Topoisomerase I活性位点的酪氨酸残基(Tyr274)与被切割的最后一个T的3'磷酸基团之间形成共价复合物而得以保留。该复合物又可以被Vaccinia DNA Topoisomerase I所酶切开的单链DNA的5'羟基所攻击，在不需要ATP和DNA连接酶的情况下，可以恢复形成之前的磷酸二酯键，即重新发生连接，同时释放出Vaccinia DNA Topoisomerase I。该酶切连接反应过程在超螺旋双链环状DNA的多个位点同时不断重复，从而可以使超螺旋环双链状DNA的超螺旋被解开。
Vaccinia DNA Topoisomerase I特异性识别的双链DNA中的5'-… (C/T)CCTT…-3'序列如果位于距离3'端几个碱基处，当Vaccinia DNA Topoisomerase I酶切DNA单链后，余下的带有5'羟基的单链DNA由于非常短而容易解离，此时Vaccinia DNA Topoisomerase I与5'-… (C/T)CCTT…-3'序列中最后一个T的3'磷酸基团之间形成的共价复合物，也可以被其它的5'端为羟基的DNA或RNA所攻击，从而形成重组的DNA分子或DNA与RNA的杂合分子。这样Vaccinia DNA Topoisomerase I酶就可作为一种体外DNA连接的新型工具，用于DNA载体和重组片段的连接、缺刻修复、接头连接等。

用途：本品仅供科研，不得用于其它用途。
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